15200 DNA去除试剂盒

特点
?	高活性，稳定DNase I– 室温稳定保存不用反复冻融较大限度保持酶的活性 
?	保护RNA– 不含RNase，*加热，*EDTA或刺激性化学试剂 
?	DNase 灭活树脂 – 完全去除DNase及二价阳离子，获得更**的QPCR结果 
?	快速 – 30min完成所有操作 
描述
DNase Max? 酶是一种高纯度的DNase I 酶，能在常温下长时间保持不失活。用于去除RNA样品中污染的基因组DNA。只需10 units（1μl）RTS DNase，即可在20min内去除30μg DNA。酶的活性能在常温下保持6个月之久，4℃下保持长达2年。DNase Max? Kit同时含有一种创新的树脂，可在反应过后特异性吸附去除RTS DNase和二价阳离子。*加热或者使用EDTA来灭活DNase。树脂处理过后的RNA可直接用于下游实验。
保持酶活 
DNase Max?是一个*分装冷冻，常温保存的DNase I酶。常温保存意味着*担心反复冻融影响酶的活性。DNase Max?拥有足够的活性维持甚至**过试剂盒本身的效期，保证了每次RNA样品处理结果的一致性。
保护你的RNA 
提取高质量RNA是件费时费钱的活。所以在DNase处理的过程中必须保护RNA避免其降解。DNase Max? Kit只使用经过验证RNase-free的试剂，处理过程*加热，使用EDTA或者刺激性的化学试剂，因此能很好地保护宝贵的RNA样品。
操作预览 
样品加入1μl RTS DNase，加入适量10X DNase Max? buffer并定容稀释使10X DNase Max? buffer较终浓度达到1X，然后37℃孵育20min。再加入DNase Max? 去除树脂去除反应液中的DNase和二价阳离子。离心把树脂沉淀下来，转移上清中的RNA样品到一个新的Tube管中。此时RNA可直接用于RT-PCR，或进行进一步分析应用。
 
图一，使用DNase Max?酶消化RNA样品中的基因组DNA。
使用RNA PowerSoil? Total RNA Isolation Kit提取两种不同类型的土壤样品。RNA样品使用DNase Max? Kit进行处理。琼脂凝胶电泳表明RNA样品中的DNA去过效果非常理想。 
 
图二，.定量检测DNase Max?酶 处理前后，RNA中的DNA含量。
对图一中的4个样品使用16s通用引物和one-step qRT-PCR kit进行扩增分析。为了定量分析基因组DNA的下降水平，分别取1μl处理前后的RNA进行qRT-PCR。结果基因组DNA减少5 logs（＞5循环），且少于背景DNA qPCR产生的曲线（红线）。标准曲线（灰色线）表明实验相关性为99%。
 
图三，DNase Max? 酶去除树脂完全去除DNase。
RNA样品分别由DNase Max? Kit和竞争对手的试剂盒进行DNA消化以及DNase去除。操作严格按照官方说明书进行。通过MO BIO DNase-free认证办法，对DNase残留活性进行分析。条带5为阴性对照，不使用DNase。所有样品37℃孵育1h，65℃ 5min灭活。1%琼脂凝胶电泳展示如图，RTS DNase树脂成功地去除掉所有DNase（条带3-4），而竞争对手产品的树脂并不能完全去除样品中的所有DNase（条带1-2）。